Estudo da toxicidade do extrato da proteína PaOLP recombinante

Resumo

A obesidade é um problema de saúde pública mundial associada a diversos tipos de doenças e alterações, como reduções nos níveis de adiponectina. Pesquisas apontam a proteína osmotina como agonista do hormônio adiponectina. Isto levou ao isolamento de um gene que codifica para uma proteína do tipo osmotina, denominado de PaOLP, o qual foi clonado em vetor pQE30 para produzir a proteína madura recombinante, PaOLPHis6, em células de E. coli M15. Visando complementar os estudos para potencial aplicação biotecnológica, neste trabalho estudou-se a toxicidade da fração solúvel da proteína PaOLPHis6 em raízes de Allium cepa. A concentração de proteínas totais presentes nos extratos a partir de células contendo ou não o gene para PaOLPHis6 (células M15 PaOLP e M15), com expressão induzida e não induzida, foi determinada por espectrofotometria. As raízes foram tratadas com os extratos de M15 PaOLP induzido e não induzido, M15 induzido e não induzido, além do controle negativo e positivo, durante 72 horas. A análise da toxicidade foi feita a partir de cortes nas raízes estudadas e produção de lâminas que foram observadas em microscópio óptico comum. Um total de 300 células por lâmina foi contabilizado, registrando-se o número de células em mitose. A análise dos dados indicou que os tratamentos com os extratos não afetaram o crescimento das raízes, bem como, a divisão celular. A presença de alterações cromossômicas e nucleares não foi observada, exceto no grupo controle positivo. Portanto, os dados dessa pesquisa não sugerem toxicidade aos extratos, e isso representa uma informação relevante. Futuros testes in vitro, em culturas de células de animais, e in vivo, em camundongos testes in vitro contribuirão para a validação da atividade e toxicidade de PaOLP.